▏ 基因編輯介紹

基因編輯（gene editing），又稱(chēng)基因組編輯（genome editing）或基因組工程（genome engineering），是一種新興的比較精確的能對生物體基因組特定目標基因進(jìn)行修飾的一種基因工程技術(shù)或過(guò)程。

早期的基因工程技術(shù)只能將外源或內源遺傳物質(zhì)隨機插入宿主基因組，基因編輯則能定點(diǎn)編輯想要編輯的基因。基因編輯依賴(lài)于經(jīng)過(guò)基因工程改造的核酸酶，也稱(chēng)“分子剪刀”，在基因組中特定位置產(chǎn)生位點(diǎn)特異性雙鏈斷裂（DSB），誘導生物體通過(guò)非同源末端連接（NHEJ）或同源重組（HR）來(lái)修復DSB，因為這個(gè)修復過(guò)程容易出錯，從而導致靶向突變。這種靶向突變就是基因編輯。

基因編輯以其能夠高效率地進(jìn)行定點(diǎn)基因組編輯， 在基因研究、基因治療和遺傳改良等方面展示出了巨大的潛力。

▏ 案例展示

 科佰生物利用基因編輯的方法，成功獲得多種MET Ex14跳躍的標準品，表現為在DNA層面出現剪切變異，在RNA層面出現14外顯子的缺失，部分產(chǎn)品羅列如下：

表1. 部分MET Ex14跳躍突變的產(chǎn)品

檢測數據如下（以c.3028+1_c.3028+9del為例，更多數據請查看www.enermatrixmedical.com）

AI-Edigene® MET Splice Site Mutation（c.3028+1_c.3028+9del）Reference Standard

Fig 1. DNA的sanger測序顯示c.3028+1_c.3028+9del


Fig 2. RNA的sanger測序發(fā)生14外顯子的缺失


Fig 3. DNA的ddPCR檢測，顯示突變頻率為100%


Fig 4. RNA的ddPCR檢測，顯示拷貝數為1315.07 copies/ng

如上數據可知，不僅僅在DNA層面發(fā)生了剪切變異，在RNA層面也發(fā)生了變異，而且根據ddPCR的拷貝數數據顯示，MET表達也大大增加了。


科佰生物在使用基因編輯技術(shù)定制定點(diǎn)突變、插入、缺失、融合上有豐富的經(jīng)驗，歡迎大家一起溝通討論。