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TLR7/NFκB-Luc/HEK293

CBP74090

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I. Background

      Toll 樣受體(TLR)是一種模式識別受體(PRR),高度保守,可識別各種類(lèi)型的微 生物病原體相關(guān)模式分子(PAMP)。在人類(lèi)中發(fā)現了 10 個(gè) Toll 樣受體家族(TLR1-10) 成員,在小鼠中發(fā)現了 12 個(gè)成員(TLR1-9、TLR11 and TLR13)。TLR1、TLR2、TLR4、 TLR5 和 TLR6 分布在細胞膜表面;TLR3、TLR7、TLR8、TLR9 和 TLR10 分布在細胞內 涵體膜表面(TLR3 識別 dsRNA,TLR9 識別 dsDNA)。TLRs 下游信號的激活主要依賴(lài)于 兩類(lèi)轉錄因子:NF-κB 和干擾調節因子(IRFs),它們主要誘導促炎細胞因子和 I 型干擾 素(IFN)的產(chǎn)生。

      TLR7 是識別病毒核酸的一種重要模式識別受體蛋白。TLR7 和 TLR8 的激活觸發(fā) Th1 型先天免疫反應的誘導。TLR7 表達在各種細胞類(lèi)型中的分布受到差異調節。與其他循環(huán) 免疫細胞相比,TLR7 的組成型表達在人和小鼠漿細胞樣樹(shù)突狀細胞 (pDC)和 B 細胞中 占主導地位。序列特異性單鏈 RNA(ssRNA)被認為是 TLR7 的天然配體,它被激活后可 誘導 IFN-α、TNF-α和 IL-12 的產(chǎn)生。來(lái)源于 HIV-1,HBV 或流感病毒等的 ssRNA 序列可 以誘導 pDC 產(chǎn)生促炎性細胞因子,發(fā)揮免疫增強的作用。此外,TLR7 靶點(diǎn)也被認為是一 個(gè)潛在腫瘤治療靶點(diǎn),TLR7/8 激動(dòng)劑 R848 能夠誘導抗腫瘤反應并減弱惡病質(zhì)。TLR7 激動(dòng)劑發(fā)揮腫瘤治療作用的機制是通過(guò)刺激 pDC 分泌 IFN-α,并作用于其他免疫細胞(NK/ 巨噬細胞),發(fā)揮免疫增強的作用;同時(shí)激活 pDC,提高 pDC 的抗呈提能力,促進(jìn) CD4 +T 細胞的增殖,并進(jìn)一步激活 CD8 +T 細胞,殺傷腫瘤細胞,發(fā)揮抗腫瘤作用。

 
II. Description

      TLR7 NFκB-Luc HEK293 報告基因藥靶模型很好的模擬了體內 TLR7 的信號轉導過(guò)程, 原理見(jiàn)下圖所示。
 



Figure 1. 
TLR7 NFκB-Luc HEK293 細胞模型原理圖

 
III. Introduction
Host Cell: HEK293
Expressed gene: TLR7、NFκB-Luc
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium:
MEM+10%FBS+1% NEAA+1 mM NaP+100 μg/ml hygromycin+1 μg/ml puromycin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
Application(s): Functional(Report Gene) Assay
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Human
Tissue: Embryonic kidney
Disease: Normal
Morphology: Epitheloid cell
Growth Properties: Adherent
 
Ⅴ. Representative Data

Figure 2.Detect Luciferase assay by Ultra Luciferase Detection Kit CBPH0001(we strongly suggest to purchase from Cobioer). Dose Response of  Ligands in TLR7 NFκB HEK293(C4).

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